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紫外分光光度計(jì)有關(guān)測量條件的討論
發(fā)布日期:2017-05-12 瀏覽次數(shù):1310
紫外分光光度計(jì)采用雙光束光學(xué)系統(tǒng),成功實(shí)現(xiàn)了高精度和高可靠性測量的結(jié)合,可滿足各種應(yīng)用的要求,可用在生物研究、生物工業(yè)、藥物分析、制藥、教學(xué)研究、環(huán)保、食品衛(wèi)生、臨床檢驗(yàn)、衛(wèi)生防疫等領(lǐng)域。
紫外分光光度計(jì)改良優(yōu)化的光路設(shè)計(jì)、進(jìn)口光源和接收器造就了系統(tǒng)高性能和高可靠性;它還擁有豐富的測量方法,具有波長掃描、時(shí)間掃描、多波長測定、多階導(dǎo)數(shù)測定、雙波長、三波長DNA蛋白質(zhì)測量等多種測量方法,可滿足不同測量的要求。
紫外分光光度計(jì)測定除需從試樣的角度選擇合適的顯色反應(yīng)和顯色條件外,還需從紫外分光光度計(jì)的角度選擇適宜的測定條件保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確度。
1.入射光波長的選擇:在大吸收波長處測定吸光度不僅能獲得高的靈敏度,而且還能減少由非單色光引起的對朗伯-比爾定律的偏離。因此在紫外分光光度計(jì)的分光光度法測定中一般選擇大吸收波長為入射波長。
2.參比溶液的選擇:在實(shí)驗(yàn)中,要選擇合適的空白溶液作為參比溶液來調(diào)節(jié)紫外分光光度計(jì)的零點(diǎn),以便消除顯色溶液中其他有色物質(zhì)的干擾,抵消吸收池和試劑對入射光的影響。根據(jù)試樣溶液的性質(zhì),選擇合適組分的參比溶液很重要。
3.吸光度范圍選擇與控制:任何紫外分光光度計(jì)都有一定的測量誤差,測量誤差的來源主要是光源的發(fā)光強(qiáng)度不穩(wěn)定法,光電效應(yīng)的非線性,電位計(jì)的非線性,雜散光的影響,單色器的光不純等因素,對于一臺(tái)固定的紫外分光光度計(jì)來說,以上因素都是固定的,也就是說它的誤差具有一定穩(wěn)定性。
4.比色皿的使用:選擇適宜規(guī)格的比色皿。同一實(shí)驗(yàn)使用同一規(guī)格的同一套比色皿,以減少測量誤差,所以用普通分光光度法不適用于高含量或極低含量物質(zhì)的測定。
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